西南大学园艺园林学院,重庆, 400715
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16 卷, 第 22 篇
收稿日期: 2017年12月22日 接受日期: 2018年01月23日 发表日期: 2018年12月20日
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16 卷, 第 22 篇
收稿日期: 2017年12月22日 接受日期: 2018年01月23日 发表日期: 2018年12月20日
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摘要
本试验通过单因子试验和正交试验的设计对‘红桃 K’彩叶芋的SCoT-PCR反应体系进行研究及优化。研究结果表明,彩叶芋 SCoT 最佳反应体系为(20 滋L):引物浓度 0.7 滋mol/L, dNTPs (10 mmol/L)浓度0.5 mmol/L, Taq DNA聚合酶 1.25 U, DNA模板80 ng, Mg2+浓度1.5 mmol/L。PCR扩增程序为: 94℃预变性4 min, 94℃变性45 s, 50.4℃条件下退火 45 s, 72℃延伸 90 s, 35个循环后, 72℃再延伸 7 min,最后 16℃保存。此外,利用市场上观赏价值较高的9个彩叶芋品种为材料,对确立的‘红桃 K’彩叶芋SCoT-PCR扩增体系进行再验证。结果表明,扩增条带清晰,重复后稳定性高,说明该反应体系为鉴定彩叶芋多样性合适的 SCoT分子标记体系,同时为后期彩叶芋遗传多样性、分子辅助育种及遗传图谱的建立提供了依据。
关键词
彩叶芋;SCoT-PCR;单因子试验;正交设计
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